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赵经理 先生
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发布时间:2020-09-15 23:14:15
PCR实验室注意事项——***储存和准备区
贮存***和用于标本制备的消耗品等材料应当直接运送至***贮存和准备区,不能经过扩增检测区,***盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区,应当保存在标本处理区。
PCR实验室注意事项——扩增区
为避免气溶胶所致的污染,应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是,所有经过检测的反应管不得在此区域打开。
PCR实验室布局
PCR实验室原则上为***准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。
PCR实验室各区功能及主要设备
样品制备区:主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。
PCR实验室装饰
实验室围护结构应牢固、气密性好;所有阴阳角宜采用圆弧过渡;墙体内壁光洁、不积尘、耐腐蚀、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或环氧树脂自流坪,材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254nm,每20㎡一支40W的紫外灯。
PCR实验室工作基本原则
由于紫外照射的距离和能量对去污染的效果非常关键,因此可使用可移动紫外灯(254nm波长),在工作完成后调至实验台上60~90cm内照射。
PCR实验室又叫***扩增实验,PCR是聚合酶链式反应简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA,可看作生物体外的特殊DNA。通过DNA***追系统,能迅速掌握生物体内的病毒含量,其精准度高达纳米级别。
PCR实验室注意事项
几个区域的大小设置情况,***准备区、扩增区、扩增产物分析区,空间可以相对小一些,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间应大一些。
PCR实验室注意事项——扩增产物分析区
核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板或芯片上探针杂交方法直接或酶切后琼脂糖凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法、质谱分析等。
PCR实验室注意事项——标本制备区
为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在***性的材料,必须在生物安全柜内开盖,并有明确的样本处理和灭活程序。
实验材料、***、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从***准备区→样品制备区→扩增区→扩增产物分析区,不得逆向流动。
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