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发布时间:2020-09-11 02:56:37
PCR实验室是分子诊断的基础,也是进行PCR实验的必备场所。近些年,分子诊断行业快速发展,对PCR的认识又进入到了一个新的阶段,但是基于实验室的基本知识仍然是非常重要的一环。
PCR实验室注意事项——标本制备区
由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染,可通过在本区内设立正压条件,避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
PCR实验室注意事项——扩增产物分析区
用过的吸头也必须放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理,如焚烧。由于本区有可能会用到某些可致***突变和***物质,故应当注意实验人员的安全防护。
PCR实验室各区功能及主要设备
样品制备区:主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。
PCR实验室装饰
实验室围护结构应牢固、气密性好;所有阴阳角宜采用圆弧过渡;墙体内壁光洁、不积尘、耐腐蚀、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或环氧树脂自流坪,材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
PCR实验室布局
实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254nm,每20㎡一支40W的紫外灯。
PCR实验室通风系统及压力控制
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流***形式,严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
PCR实验室工作基本原则
1.进入各工作区域应当严格按照单一方向进行
***储存和准备区→标本制备区→扩增区→ 扩增产物分析区。
2.各工作区域必须有明确的标记,不同工作区域内的设备、物品不得混用。
扩增产物分析区:扩增产物的测定。本区主要设备加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
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